Treść artykułu

Stosowane techniki i metody


Ocena cytotoksyczności podstawowej

  • Badania in vitro na hodowlach komórkowych z użyciem technik spektrofotometrycznych, m.in. test wychwytu czerwieni obojętnej (Neutral Red Uptake assay; zgodnie z normą EN-PN ISO 10993-5/Aneks A), test redukcji MTT, XTT, WST-1, Alamar blue, test z barwieniem sulforodaminą B


Ocena mechanizmów cytotoksyczności

  • Analiza apoptozy/nekrozy, potencjału błon mitochondrialnych, stężenia wolnych rodników, cyklu komórkowego za pomocą cytometrii przepływowej oraz analizy wieloparametrycznej (High Content Analysis)


Ocena genotoksyczności/mutagenności in vitro

  • Test mikrojądrowy in vitro (OECD TG 487)
  • Test mutacji genu kinazy tymidynowej na mysich komórkach chłoniaka L5178Y TK+/- (OECD TG 490)
  • Test kometowy – badanie jedno- i dwuniciowych pęknięć DNA, miejsc wrażliwych na alkalia, oksydacyjnych uszkodzeń zasad DNA bez i z zastosowaniem enzymów naprawczych, np. glikozylazę formamido-pirymidynową (FPG)


Analiza ultrastruktury preparatów biologicznych (np. pelety komórek z badań in vitro; tkanki pobrane z badań toksykologicznych) przy użyciu skaningowego mikroskopu elektronowego (SEM).